柱式昆蟲RNAout
柱式昆蟲RNAout低于1.7,考慮RNA降解,*常見的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果來(lái)不及也可以買現(xiàn)成的。
2.提取時(shí)注意低溫,防止RNA降解。
3.洗滌用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA,-70度保存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(一般不超過(guò)一個(gè)月)。
柱式昆蟲RNAout提RNA提取秘訣:
1.提取RNA過(guò)程應(yīng)該盡量快,不要太過(guò)仔細(xì),以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時(shí)要小心,離心管盡量不要抖動(dòng)和傾斜,保持其從離心機(jī)里拿出來(lái)的角度吸取,加入異丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要貪多
3.柱式昆蟲RNAout干燥時(shí)不要太過(guò)
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳?這個(gè)結(jié)果不是很準(zhǔn)確,因?yàn)樵谂苣z的過(guò)程當(dāng)中RNA也會(huì)降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情況下跑出來(lái)的電泳結(jié)果有3條帶,2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶,分別是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄,柱式昆蟲RNAout然后用管家基因檢測(cè),只要能擴(kuò)出明亮的條帶即對(duì)你的實(shí)驗(yàn)沒有影響。注意:在用管家基因檢測(cè)時(shí)應(yīng)增加循環(huán)數(shù),以檢測(cè)是否有DNA污染。
XY80908 一站式動(dòng)物mRNAOUT 25次 XY130512 一站式磁珠法動(dòng)物mRNAOUT 50次 XY81108 一站式全血mRNAOUT 25次 XY81028 一站式植物mRNAOUT 25次 XY81103 一站式**mRNAOUT 25次 XY80817 mRNA提取試劑盒 25次 XY131231 Oligo(dT)纖維素 25mg XY130976 Oligo(dT)再生溶液 100mL XY130977 生物素化的Oligo(dT) 5ug XY130521 鏈霉親和素磁珠 2mL XY3090 固相RNase**劑 100mL|250mL XY130983 氣相RNase**劑 120mL XY3091 液相RNase**劑 1.5mL XY3110 氧釩核糖核苷復(fù)合物 10mL XY3100 RNA長(zhǎng)效保存液 1.5mL XY3290 RNase抑制劑(人源) 400U|2500U XY130699 RNase 抑制劑(小鼠源) 3000U XY60201 非酶DNA**劑 1.5mL XY70801 非酶DNA**劑-2 15次 XY90318 柱式DNA**劑 50次 XY90802 大提柱式DNA**劑 5次