一站式動(dòng)物mRNAout
一站式動(dòng)物mRNAout低于1.7，考慮RNA降解，*常見的原因是RNA酶去除不徹底。
建議你1.EP管和tip用DEPC水泡，如果來不及也可以買現(xiàn)成的。
2.提取時(shí)注意低溫，防止RNA降解。
3.洗滌用的75％酒精用DEPC水配制，*后融解RNA的水也應(yīng)是DEPC水，或去RNA酶水。
4.提取的RNA盡快轉(zhuǎn)錄成cDNA，－70度保存時(shí)間不宜過長(zhǎng)（一般不超過一個(gè)月）。
一站式動(dòng)物mRNAout提RNA提取秘訣：
1.提取RNA過程應(yīng)該盡量快，不要太過仔細(xì)，以減少RNA的降解
2.在吸取上清液時(shí)要小心，離心管盡量不要抖動(dòng)和傾斜，保持其從離心機(jī)里拿出來的角度吸取，加入異丙醇的那一步要尤其小心，上清液不要貪多
3.一站式動(dòng)物mRNAout干燥時(shí)不要太過
4.你跑的電泳是不是普通的瓊脂糖凝膠電泳？這個(gè)結(jié)果不是很準(zhǔn)確，因?yàn)樵谂苣z的過程當(dāng)中RNA也會(huì)降解，但并不一定你提取的RNA效果不好，一般情況下跑出來的電泳結(jié)果有3條帶，2000bp,1000bp,100多的位置各有一條帶，分別是28s，18s，5s，如果5S很亮，表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反轉(zhuǎn)錄，一站式動(dòng)物mRNAout然后用管家基因檢測(cè)，只要能擴(kuò)出明亮的條帶即對(duì)你的實(shí)驗(yàn)沒有影響。注意：在用管家基因檢測(cè)時(shí)應(yīng)增加循環(huán)數(shù)，以檢測(cè)是否有DNA污染。
克隆及表達(dá)
XY60105加A試劑盒50次XY60106加T試劑盒50次XY60107DNA粘轉(zhuǎn)平試劑盒20次XY130813DNA磷酸化試劑盒20次XY130828DNA去磷酸化試劑盒20次XY4610G載體2μgXY51104B載體2μgXY60603即用型藍(lán)白T載體A型(T7-SP6，有MCS)20次XY120512即用型藍(lán)白T載體B型(T7-T3,有MCS)20次XY120513即用型藍(lán)白T載體C型(T7-T3，無MCS)20次XY120514即用型藍(lán)白T載體D型(無啟動(dòng)子，有MCS)20次XY120515即用型藍(lán)白T載體E型(無啟動(dòng)子，無MCS)20次XY60803可保種型藍(lán)白T載體50ngXY131233零背景T載體20次XY60908質(zhì)粒(載體)系列產(chǎn)品2μgXY120402PCR專用LIC克隆套裝1ugXY130859M13mp18 DNA10μg(A)|10μg(B)XY90407Lambda DNA5μg(A)|250μg(B)|250μg(C)XY130860φX174 RFⅠDNA30μgXY130861φX174RF Ⅱ DNA30μgXY130987接頭DNA5nmol(A)|5nmol(B)|5nmol(C)|5nmol(D)|5nmol(E)XY130988EcoR I-Not I-BamH I接頭1nmolXY130204Oligo快速?gòu)?fù)性液，10×1mLXY100103裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81109酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81201酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20次XY100502高效E.coli感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒20次XY81024DH5α感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY81221HB101感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY90207JM109感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY90208SURE感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY80701TG1感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY80806Top10感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY90504XL1-Blue感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10XY100818MDS 42rec A trf A菌種1mLXY100819MDS 42T7lac 菌種1mLXY70602DNA快速連接試劑盒30次|100次XY90801一站式TA克隆試劑盒20次(A)|20次(B)XY131126一站式平末端克隆試劑盒20次XY130827小RNA克隆試劑盒10次XY130681通用 miRNA 克隆接頭0.83nmolXY51101常態(tài)轉(zhuǎn)化液20次XY50901菌落PCR試劑盒2.050次XY100884IPTG干粉2.5gXY80909IPTG溶液1.5mLXY100885X-Gal干粉0.5gXY80910X-Gal溶液10mLXY70803免質(zhì)粒提取篩選試劑盒1000次XY60404超級(jí)培養(yǎng)基100mLXY100602干粉型LB培養(yǎng)基250gXY100820干粉型LB-Lennox培養(yǎng)基250gXY100821干粉型2×YT培養(yǎng)基250gXY100822干粉型SB培養(yǎng)基250gXY100813干粉型SOB培養(yǎng)基250gXY100823干粉型SOC培養(yǎng)基250gXY100825自誘導(dǎo)培養(yǎng)基(lac啟動(dòng)子)200mLXY100824干粉型TB培養(yǎng)基250gXY100826穿刺培養(yǎng)基10管XY100827菌種保存液10管(A)|10管(B)XY130895YPD液體培養(yǎng)基100mLXY130896YPG液體培養(yǎng)基100mLXY130897YPDG液體培養(yǎng)基