DNA提取 ：一、4mL 離心超濾管實(shí)驗(yàn)原理
DNA是遺傳信息的載體，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中*重要、*基本的操作之一。我公司提供從各種不同來(lái)源的樣品（如**、**、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、細(xì)胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化銨）是一種陽(yáng)離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，4mL 離心超濾管通過(guò)有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來(lái)。此法多用于植物組織、**等材料。
● SDS法 SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、**、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及檢測(cè)
● 4mL 離心超濾管瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度 DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測(cè)DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說(shuō)明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說(shuō)明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
三、4mL 離心超濾管樣品處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——?jiǎng)驖{、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
4mL 離心超濾管注意：客戶*好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
XY2601 DNAzol 基因組DNA快速提取試劑 50ml/100ml
XY3201 石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒 50次/100次
XY3601 尿液基因組DNA快速提取試劑盒 50次
XY3701 海洋動(dòng)物組織基因組DNA快速提取試劑盒 50次/100次
XY4201 蛋白酶K 100mg
XY3301 2 x SYBR Green qPCR Mix (Sybr green熒光染料法定量PCR) 50次×50μl/200次×50μl
XY3901 2 x Real Time PCR Mix (Probe熒光探針法定量PCR) 40次×50μl/200次×50μl
XY3601 TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit (兩步法熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 25次×50μl/50次×50μl
XY4601 THERMOscript SYBR Green qRT-PCR Kit(兩步法熒光定量耐熱反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 25次×50μl/50次×50μl
XY4101 TUREscript One Step qRT-PCR Kit (一步法熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY4201 THERMOscript One Step qRT-PCR Kit(一步法熒光定量耐熱反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl
XY3501 快速植物DNA提取擴(kuò)增套裝 50次/100次/200次
XY1701 TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(反轉(zhuǎn)錄酶) 5000U/10000U/10000U×5
XY4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐熱反轉(zhuǎn)錄酶) 5000U/10000U
XY1801 TUREscript 1st Strand cDNA (**鏈反轉(zhuǎn)錄試劑盒) 25次/50次
XY4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(**鏈耐熱反轉(zhuǎn)錄試劑盒) 25次/50次
XY3401 TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒) 50次×50μl/100次×50μl