DpnI
產品編號
產品名稱
產品包裝
產品價格
XY2258
2500U
956.00元
DpnI內切酶為*新研發(fā)產品,基本信息如下:
識別序列
緩沖液兼容性(%)
酶切溫度
失活條件
甲基化干擾?
GA* ^TC CT ^A*G
1X B
1X G
1X O
1X R
1X Y
2X Y
37℃
80℃ 20min
甲基化的序列 才可被酶切
100
50-100
*,該位點甲基化后才可以被DpnI所識別并酶切。 DpnI識別并酶切DNA雙鏈中腺嘌呤N6位甲基化(N6-methyladenine)的GATC序列。DpnI識別位點中兩個腺嘌呤的N6位都甲基化時,呈現(xiàn)正常的酶活力;只有一個腺嘌呤的N6位甲基化時,酶切活力會降低約60倍。 從dam+(Dam甲基化酶表達陽性)大腸桿菌菌株如DH5α等提取的質粒的GATC序列中腺嘌呤N6位被甲基化,從而可以被DpnI識別和酶切;而從dam-(Dam甲基化酶表達陰性)大腸桿菌菌株如JM110等提取的質粒的GATC序列中腺嘌呤N6位沒有被甲基化,從而不能被DpnI識別和酶切(參考圖1)。
酶儲存液組成為:10mM Tris-HCl (pH7.4 at 25℃),300mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mg/ml BSA and 50% glycerol。 1X Buffer Y組成為:33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37℃),10mM magnesium acetate,66mM potassium acetate,0.1mg/ml BSA。 酶切和連接效率:50倍過量的本內切酶消化1小時,>70%被酶切的pBR322 DNA片段可以重新連接,這些片段>95%可以被重新酶切(recut)。 活性單位定義:在37℃,50微升反應體系中反應1小時,將1微克的λDNA完全分解的酶量定義為1個活性單位,即1U。 包裝清單:
包裝
XY2258-1
DpnI(10U/μl)
XY2010Y
10X Buffer Y
1ml
-
說明書
1份
保存條件: -20℃保存。 注意事項: 內切酶使用時宜存放在冰盒內或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。 如果發(fā)現(xiàn)預期的酶切位點不能切開,請確認特定位點是否已經被甲基化。 本產品**于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或**,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。