RNase Inhibitor

      RNase Inhibitor (Ribonuclease Inhibitor)，即RNases抑制劑，是一種大腸桿菌重組表達的人胎盤核糖核酸酶抑制劑
(human placental RNase inhibitor)，可以通過非競爭性方式按1:1比例和RNase A、RNase B、RNase C和人胎盤核糖核酸酶(human placental RNase)結(jié)合，并抑制這些酶的活性，從而保護RNA不被這些酶降解。
      RNase Inhibitor對RNase A、RNase B、RNase C和人胎盤核糖核酸酶的抑制能力極強，其Ki值低至約為4×10^-14M。通?？贵w和抗原的親和常數(shù)僅為10^-6-10^-9M。并且RNase Inhibitor和這些RNA酶的結(jié)合是非?？焖俚模瑤缀踉诩尤氲乃查g就會和這
些RNA酶形成復合物從而抑制其酶活性。
      RNase Inhibitor不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2、CL3、RNase from Aspergillus、S1 Nuclease、Taq DNA
polymerase、M-MLV reverse transcriptase和SP6、T7、T3 RNA polymerase的的酶活性。
      RNase Inhibitor在pH 5-8范圍內(nèi)保持其RNA酶抑制活性，在pH 7-8時抑制活性*高。RNase Inhibitor維持其活力需要至少在溶液中含有1mM DTT。
      本產(chǎn)品與Thermo公司的RiboLock RNase Inhibitor以及Promega公司的RNasin Ribonuclease Inhibitor屬于同類產(chǎn)品，都是重組表達的人胎盤核糖核酸酶抑制劑，對于RNase的抑制效果也完全相同(參考圖1和圖2)。

      圖1. 的RNase Inhibitor和同類產(chǎn)品(Competitor RNase Inhibitor)對RNase A酶活性的抑制效果比較。5μg yeast RNA與0或2ng RNase A及8、4、2、1或0U RNase Inhibitor，在100μl的反應體系(50mM MOPS, 5mM MgCl₂, pH6.5)中，37℃孵育15分鐘。反應完畢后立即取20μl反應液用1%瓊脂糖凝膠進行電泳分析。

      圖2. 的RNase Inhibitor和同類產(chǎn)品(Competitor RNase Inhibitor)對RNase A的酶活性的抑制效果比較。2μg Hela細胞總RNA與0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor，在20μl的反應體系(50mM MOPS, 5mM MgCl₂, pH6.5)中，37℃孵育15分鐘。反應完畢后立即全部用1%瓊脂糖凝膠進行電泳分析。

      用途：用于cDNA合成，體外轉(zhuǎn)錄，體外翻譯，以及mRNA-protein復合物分離純化等過程中保護RNA不被降解；還可用于特定RNase活性的鑒定等。
      來源：由大腸桿菌表達，表達基因的來源為human placenta中編碼該酶的基因。
      分子量：約49.6 kDa(單體)。
      活性定義：將能夠抑制5ng RNase A的50%活性的酶量定義為一個活性單位。
      活性檢測條件：100mM Tris-HCl (pH7.5), 1.2mM EDTA, 0.1mg/ml BSA, 100ng/ml RNase A, 0.1mg/ml E.coli [3H]-
RNA, 50mg/ml yeast RNA, 8mM DTT。
      純度：不含DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNA酶。
      儲存溶液：20mM HEPES-NaOH (pH7.5), 50 mM NaCl, 8 mM DTT, 50% (v/v) glycerol。
      失活或抑制：75℃加熱10分鐘可以導致完全失活。70℃加熱10分鐘仍會有微量活性殘留。SDS和尿素等導致蛋白變性的試劑
以及對氯汞基苯甲酸鹽(p-chloromercuribenzoate)、重鉻酸鉀等氧化劑會抑制RNase Inhibitor與RNA酶的結(jié)合。
包裝清單：

保存條件：
      -20℃保存。
注意事項：
      使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
      酶儲存溶液中加入DTT可保證RNase Inhibitor長期貯存的穩(wěn)定性。
      本產(chǎn)品**于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或**，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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