DNA提取 ：一、Anaerobranca gottschalkii medium實(shí)驗(yàn)原理
DNA是遺傳信息的載體，是*重要的生物信息分子，因此DNA的提取也是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中*重要、*基本的操作之一。我公司提供從各種不同來(lái)源的樣品（如**、**、血液、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物組織及植物組織等）中提取高純度基因組DNA的服務(wù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1、細(xì)胞裂解
● CTAB法 CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide，十六烷基**基溴化銨）是一種陽(yáng)離子去污劑，可融解細(xì)胞膜，并與核酸形成符合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中（>0.7M NaCl）是可溶的，Anaerobranca gottschalkii medium通過(guò)有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來(lái)。此法多用于植物組織、**等材料。
● SDS法 SDS是一種陰離子去污劑，高溫（55℃-65℃）下可裂解細(xì)胞，使蛋白變性、染色體解析。常用于血液、**、酵母、動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品基因組DNA的提取。
● 其他方法 物理方法如機(jī)械剪切、超聲波破碎、勻漿等，化學(xué)方法如異硫氰酸胍、堿裂解、蛋白酶K消化等。
2、DNA分離純化
● 用酚/氯仿抽提裂解液，收集水相，乙醇沉淀DNA，*后用TE溶解DNA沉淀。
3、DNA的定量及檢測(cè)
● Anaerobranca gottschalkii medium瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA片段的分子質(zhì)量。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA濃度 DNA在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。提取的基因組DNA樣品濃度＝OD260×50ug/ml×稀釋倍數(shù)。
● 紫外分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度
一般用OD260/OD280值檢測(cè)DNA樣品的純度。OD260/OD280值約為1.7-1.9，說(shuō)明DNA純度較好；若小于1.7有可能有蛋白污染；若大于2.0，說(shuō)明有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。
三、Anaerobranca gottschalkii medium樣品處理
因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含成分不同，樣品預(yù)處理的方法也有差異。不同樣品的預(yù)處理方法大致如下：
● 植物組織——液氮研磨
● 動(dòng)物組織——?jiǎng)驖{、液氮研磨
● 培養(yǎng)細(xì)胞——蛋白酶K消化
● 細(xì) 菌——溶菌酶消化
● 酵 母——Lyticase消化、玻璃珠破碎
Anaerobranca gottschalkii medium注意：客戶*好提供新鮮的樣品或取樣后立即在低溫（-20℃或-70℃）冷凍保存的樣品，避免反復(fù)凍溶。
**劑30次XY81215一站式Western印跡套裝(顯色法)20次(A)|20次(B)XY131104Western 封堵液500mLXY131105酪蛋白封堵液100mL(A)|100mL(B)XY131236牛血清白蛋白封堵液250mLXY131109Tris 緩沖鹽溶液(TBS)10包XY131112氯萘酚溶液50mLXY131114ABTS 溶液50mlXY131115OPD 干粉25gXY131116pNPP 干粉1gXY131108ONPG 干粉1gXY101122尼龍膜1張XY101123PVDF膜1張XY81206氨基黑染膜液250mLXY100924麗春紅S染膜液250mLXY100928濕法電轉(zhuǎn)液(干粉)20LXY81207半干法電轉(zhuǎn)液(干粉)20LXY100878Western印跡膜封膜液100mLXY81208印跡膜抗體稀釋液100mLXY80813Western印跡膜抗體**劑50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑藍(lán)250mgXY81224BCIP/NBT顯色試劑盒100mLXY100214預(yù)混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增強(qiáng)型DAB顯色試劑盒100mLXY101106沉淀型TMB顯色試劑盒100mLXY91101一管式 TMB 顯色液100mL(A)XY120201超敏化學(xué)發(fā)光(HRP)檢測(cè)試劑盒25mL|250mLXY131192超敏化學(xué)發(fā)光(AP)檢測(cè)試劑盒25mLXY131142魯米諾1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑200mLXY130565β-Actin小鼠單抗30μLXY130566α-Actin小鼠單抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠單抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠單抗30μLXY130569GAPDH小鼠單抗30μLXY130570植物Actin小鼠單抗30μLXY130571組蛋白3.1小鼠單抗30μLXY130572COX IV兔單抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L)，堿性磷酸酶標(biāo)記100μLXY131148驢抗山羊IgG，堿性磷酸酶標(biāo)記60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L)，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記300μLXY131152兔抗雞IgY，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記300μLXY131153驢抗山羊IgG，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記60μLXY131154山羊抗小鼠IgG，熒光素488標(biāo)記0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG，熒光素555標(biāo)記0.1mgXY131156山羊抗兔IgG，異硫氰酸熒光素標(biāo)記0.1mgXY131157藻紅蛋白標(biāo)記山羊抗兔IgG0.1mgXY131158熒光素488標(biāo)記山羊抗兔IgG0.1mgXY131159熒光素555標(biāo)記山羊抗兔IgG0.1mgXY131160異硫氰酸熒光素標(biāo)記山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG，藻紅蛋白標(biāo)記0.1mgXY100841β-巰基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,電泳級(jí))100mLXY90311電泳級(jí)Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白樣品處理試劑盒500次
工具酶